目的: 研究新型复配药剂2%阿维菌素·6%氟吡菌酰胺在防治松材线虫病方面的潜力, 旨在探索一种可能替代阿维菌素和甲维盐的新药剂新配方。方法: 将复配药剂2%阿维菌素·6%氟吡菌酰胺与5%阿维菌素和5%氟吡菌酰胺进行毒力药效对比。通过浸虫法进行室内杀线效果试验, 分析3种药剂对松材线虫的致死效果。分别用3种药剂LC20(亚致死浓度)的药量均匀喷雾在灰葡萄孢上, 观察在不同药剂处理下松材线虫在灰葡萄孢上的取食情况及松材线虫生长繁殖数量, 计算亚致死浓度下松材线虫的繁殖速率。收集松材线虫卵于皿底, 加入不同浓度药剂于培养皿, 24 h后观察卵孵化情况, 计算卵孵化率, 并用蔡司荧光显微镜观察卵形态。将松材线虫与药剂混合置于梯度温度培养箱, 分析不同温度条件下复配药剂2%阿维菌素·6%氟吡菌酰胺对松材线虫杀线效果。结果: 1) 3种药剂处理松材线虫24 h后, 2%阿维菌素·6%氟吡菌酰胺、5%阿维菌素、5%氟吡菌酰胺的LC50(致死中浓度)分别为2.020 8、51.153 6和21.607 1 mg·L-1, LC20分别为0.447 9、12.031 8和8.558 2 mg·L-1, 杀线效果2%阿维菌素·6%氟吡菌酰胺>5%氟吡菌酰胺>5%阿维菌素。2) 3种药剂LC20浓度喷雾处理6天后, 2%阿维菌素·6%氟吡菌酰胺和5%氟吡菌酰胺处理组松材线虫量仅有(1 425± 250)、(1 675 ± 377)头, 远低于5%阿维菌素处理组(10 925± 504)头和对照组(>20 000)。3) 卵孵化率试验表明, 3种药剂均能显著抑制松材线虫卵的孵化, 且随着药剂浓度的升高, 松材线虫卵孵化率下降, 24 h后, 在浓度3 mg·L-1时, 对卵孵化抑制效果2%阿维菌素·6%氟吡菌酰胺>5%阿维菌素>5%氟吡菌酰胺, 孵化率分别为20.32%、21.36%、22.89%; 2%阿维菌素·6%氟吡菌酰胺在浓度10 mg·L-1处理24 h后, 松材线虫卵内产生液泡, 卵死亡。4) 在温度梯度试验中, 15~35℃条件范围内, 每增加5℃, 复配药剂2%阿维菌素·6%氟吡菌酰胺杀线效果上升。结论: 新型复配药剂2%阿维菌素·6%氟吡菌酰胺杀对松株材线虫具有显著的毒力加性作用, 比2种药剂单独作用时毒力明显提高, 该复配药剂有潜力成为一种新的预防松材线虫病树干注射剂。
目的: 研究不同株系松材线虫对红松致病力的差异, 探究感病红松早期防御酶活性变化与致病力之间的关系, 为红松松材线虫病防治提供参考。方法: 以4年生红松幼苗为研究对象, 人工接种辽宁清原株系(QH-1)、江苏南京株系(NM-1)与重庆株系(CM-1)松材线虫, 每株接种2000条, 并在接种1~7天分别对幼苗进行叶片取样, 测定超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)与过氧化物酶(POD)。在完成早期防御酶活性统计后, 持续对接种红松幼苗进行病害(针叶变色、嫩枝变化)观察, 分析各株系松材线虫致病力差异。结果: QH-1、NM-1和CM-1接种红松幼苗后, 上述4种防御酶活性变化趋势存在明显差异, 且接种QH-1处理组防御酶活性变化幅度大于其他线虫处理组。致病力统计结果表明, QH-1、NM-1与CM-1对红松均有致病力, 其中QH-1致病力最强, NM-1与CM-1无明显差异。防御酶活性变化幅度与致病力统计结果表明, 强致病力松材线虫导致红松幼苗防御酶活性变化幅度最大。结论: 4年生红松接种不同致病力松材线虫后, 发病早期防御酶活性变化存在差异, 且强致病力松材线虫株系导致接种红松防御酶活性变化幅度大于弱致病力松材线虫株系。
目的: 研究广东省和江苏省松材线虫的遗传变异, 为我国松材线虫病的疫源追溯研究奠定基础, 并为松材线虫病防控工作提供有力支持。方法: 使用Illumina全基因组重测序的方法, 对所有松材线虫样本进行测序深度>40×的高通量测序。测序结果经过FastQC质量检测后, 利用Cutaadpt软件去除接头序列。利用BWA软件将重测序结果与松材线虫基因组进行比对, 使用Samtools和Picard将比对结果进行排序和去冗余, 利用Freebayes进行SNP位点挖掘。而后使用VCFtools筛选统计松材线虫SNP位点信息以及突变基因型种类, 并用SNPRelate构建所有虫株的系统发育树, 最后进行焦磷酸测序验证。结果: 在广东省和江苏省疫木中共分离得到24株松材线虫, 两省各12株。在所有松材线虫样本中共发现15 100 281个SNP位点, 其中广东省虫株共发现12 990 503个SNP位点, 江苏省虫株共发现2 109 778个SNP位点。对所有SNP位点统计分析后发现, 广东省虫株的SNP数量和纯合子数量比江苏省虫株多, 且差异性显著。此外, 广东省大部分虫株出现频率最高的突变基因型为A→G、C→T、G→A、T→C, 而所有江苏省虫株与2株广东省虫株GD09和GD12的高频基因型则为A→G、C→G、G→C、T→C。通过聚类分析发现, 江苏省虫株和广东省大部分虫株之间遗传分化明显, 除GD09和GD12与江苏省虫株聚为一类之外, 其他虫株按省份不同分别聚为两类, 推测其可能是从江苏有通过人为活动远距离传播至广东省。后续焦磷酸测序试验也验证了测序分析结果的准确性, 支持了上述研究结果。结论: 广东省虫株之间存在明显的遗传分化现象, 结合我国各地松材线虫病发生时间, 推测广东省大部分地区和江苏省的松材线虫具有不同的传播来源, 而广东省韶关市和汕头市松材线虫虫株和江苏省虫株具相同的传播来源。
(月刊 1955年创刊) 主管:中国科学技术协会 主办:中国林学会 出版:《林业科学》编辑部 主编:尹伟伦 国内统一刊号:CN 11-1908/S 国际标准刊号:ISSN 1001-7488 国内邮发代号:82-6