松材线虫rDNA-ITS2的Taq Man探针实时荧光PCR检测

doi:10.11707/j.1001-7488.20050213

林业科学 ›› 2005, Vol. 41 ›› Issue (2): 82-85.doi: 10.11707/j.1001-7488.20050213

松材线虫rDNA-ITS2的Taq Man探针实时荧光PCR检测

王明旭^1,2 朱水芳³ 罗宽¹ 周李华¹ 赵文军³

1.湖南农业大学生物安全科技学院,长沙410128,2.湖南省森林病虫害防治检疫总站长沙410007；3.中国检验检疫科学研究院动植物检疫研究所,北京100029

收稿日期:2004-10-18 修回日期:1900-01-01 出版日期:2005-03-25 发布日期:2005-03-25

Studies on Real-Time Fluorescent PCR With TaqMan Probe for rDNA-ITS2 of Pine Wood Nematode(Bursaphelenchus xylophilus)

Wang Mingxu^1,2,Zhu Shuifang³,Luo Kuan¹,Zhou Lihua¹,Zhao Wenjun³

1.College of Bio-safety Science and Technology, Hunan Agric. Univ. Changsha 410128; 2.General Station of Forest Pest Management and Quarantine, Hunan Province Changsha 410007; 3. Institute of Animal and Plant Quarantine, CAIQ Beijing 100029

Received:2004-10-18 Revised:1900-01-01 Online:2005-03-25 Published:2005-03-25

摘要/Abstract

摘要：

以松材线虫rDNA -ITS2为靶区,建立松材线虫的TaqMan探针实时荧光PCR检测方法。对松材线虫大量DNA和单条线虫的检测结果表明,探针检测松材线虫和拟松材线虫时,前者产生明显的荧光信号,后者无荧光信号,表明探针具有高度的特异性;探针检测到最低模板浓度为1pg·μL^-1 ,DNA测序结果与实时荧光PCR结果一致。

关键词: rDNA-ITS2, TaqMan探针, 松材线虫, 检测

Abstract:

A real time fluorescent PCR(ATF-PCR) method with TaqMan probe that was designed within rDNA-ITS2 was established to detect Pine Wood Nematode, Bursaphelenchus xylophilus. The results of detecting mass DNA and single nematode showed that fluorescent signal was detected for B. xylophilus and no signal for B. mucronatus. The BXP probe was high specific for Pine Wood Nematode. The lowest concentration detected by TaqMan probe was 1 pg·μL^-1. The results of DNA sequence and ATF-PCR detection was coincidence. The research provided a new detection method for Pine Wood Nematode.

Key words: rDNA-ITS2, TaqMan probe, Bursaphelenchus xylophilus, detection

王明旭;朱水芳罗宽周李华赵文军. 松材线虫rDNA-ITS2的Taq Man探针实时荧光PCR检测[J]. 林业科学, 2005, 41(2): 82-85.

Wang Mingxu;Zhu Shuifang;Luo Kuan;Zhou Lihua;Zhao Wenjun. Studies on Real-Time Fluorescent PCR With TaqMan Probe for rDNA-ITS2 of Pine Wood Nematode(Bursaphelenchus xylophilus)[J]. Scientia Silvae Sinicae, 2005, 41(2): 82-85.

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松材线虫rDNA-ITS2的Taq Man探针实时荧光PCR检测

Studies on Real-Time Fluorescent PCR With TaqMan Probe for rDNA-ITS2 of Pine Wood Nematode(Bursaphelenchus xylophilus)

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