林业科学 ›› 2010, Vol. 46 ›› Issue (11): 16-24.doi: 10.11707/j.1001-7488.20101103
文樵夫,沈红香,姚允聪,田佶,宋婷婷
Wen Qiaofu;Shen Hongxiang;Yao Yuncong;Tian Ji;Song Tingting
摘要:
以苹果属观赏海棠品种‘王族’叶片总RNA为模板,通过RT-PCR与RACE扩增,获得1个1 247 bp的二氢黄酮醇-4-还原酶基因的cDNA序列,其基因编码区共1 021 bp,存在3个ORF,编码348个氨基酸,命名为McDFR。基因序列全长2 396 bp,有5个内含子,所有内含子的剪切位点均符合真核生物“GT-AG”规则。使用实时荧光定量PCR和紫外可见光分光光度计,对4种不同叶色类型的观赏海棠品种‘火焰’(绿色类叶片)、‘绚丽’(新叶有色类红色叶片)、‘高原之火’(新叶有色类红色叶片)和‘王族’(常色类紫色叶片)幼叶和功能叶中的McDFR表达及其花色苷和类黄酮的含量进行测定分析,结果表明: McDFR在4个品种的幼叶和功能叶中均有表达,McDFR表达量与花色苷积累有一定的相关性,McDFR在幼叶中表达量高于功能叶; 在4个品种中,McDFR 在‘高原之火’幼叶中表达量最大。幼叶中的类黄酮含量高于功能叶,McDFR表达量也大于功能叶。在功能叶中,除绿色叶品种‘火焰’外,类黄酮含量越高,McDFR的表达量越大,说明McDFR对苹果属观赏海棠叶片花色苷、类黄酮代谢途径及色泽形成具有重要作用。