林业科学 ›› 2008, Vol. 44 ›› Issue (10): 43-48.doi: 10.11707/j.1001-7488.20081008
张 琳1 谭晓风1 周 建2 何小勇3 袁德义1 胡 姣1 龙洪旭1
Zhang Lin1,Tan Xiaofeng1,Zhou Jian2,He Xiaoyong3,Yuan Deyi1,Hu Jiao1,Long Hongxu1
摘要:
砂梨是重要的经济树种,表现出典型的配子体自交不亲和性,在生产和育种上需鉴定品种的 S基因型以确定品种间的亲和性。选取7个砂梨品种为试验材料,使用梨SRNase(S基因)通用引物进行基因组PCR扩增,产物通过1.8%的琼脂糖凝胶电泳分析。结果表明:‘楚比香’等4个品种中产生了预期的2条电泳条带,而其他3个品种都只产生1条带产物,通过6%的聚丙烯酰胺电泳对该3个品种的PCR产物进一步分析,结果产物被成功分离。将7个品种中分离到的14个条带分别回收、克隆、测序及序列分析,从中鉴别出10个具有梨S RNase基因序列特征的S基因,其中‘政和大雪梨’中494 bp的基因片段被鉴定为新的S基因,暂命名为S 43 RNase(GenBank接受号EF566873)。RTPCR试验证明S43 RNase仅在花柱中特异表达,符合SRNase的表达特征。通过比对S43 RNase的基因组序列和cDNA序列,确定其内含子大小为294 bp。在推导氨基酸水平上,S43RNase与苹果亚科其他S RNase表现出65%~92%的相似性。