林业科学 ›› 2004, Vol. 40 ›› Issue (5): 99-104.doi: 10.11707/j.1001-7488.20040516
安新民 张上隆 徐昌杰 陶俊 秦巧平
An Xinmin,Zhang Shanglong,Xu Changjie,Tao Jun,Qin Qiaoping
摘要:
根据不同植物液泡转化酶基因序列的保守区设计合成引物,采用滤纸吸附噬菌体PCR法,首次从甜橙基因组文库筛选出含甜橙液泡转化酶基因的阳性λ噬菌体,经过大量培养并提取其DNA ,限制性内切酶消化后进行DIGsouthern印迹分析,将阳性条带回收、加工并克隆测序。序列分析表明,该基因全长4 722bp ,编码5 88个氨基酸,包括6个外显子和5个内含子。在GenBank进行Blast检索的结果表明,该基因编码的氨基酸序列与马铃薯、番茄和酸樱桃液泡转化酶基因编码的氨基酸序列同源性分别为68%、68%和62 %。系统进化关系聚类分析结果表明,该基因属液泡转化酶基因类型。该基因已经在GenBank登录(登录号:AF4 336 4 3)。该基因的获得为从分子水平研究柑桔果实发育过程中蔗糖积累和分解机制以及通过基因工程改良果实品质奠定了基础。