林业科学 ›› 2001, Vol. 37 ›› Issue (3): 78-82.doi: 10.11707/j.1001-7488.20010313
赵同海 张永安 王玉珠 陈昌洁
Zhao Tonghai,Zhang Yongan,Wang Yuzhu,Chen Changjie
摘要:
为研究DsCPV在松毛虫种群中的垂直传递及对松毛虫灾害的持续控制作用,通过反转录聚合酶链式反应(RT PCR)建立了DsCPV的早期检测技术。依据家蚕质型多角体病毒(BmCPV)质型多角体蛋白的核苷酸序列设计一对引物,从纯化的DsCPV、BmCPV和舞毒蛾质型多角体病毒(LdCPV)的基因组dsRNA可成功地扩增出长6 14bp的目的片段,从提取的健康松毛虫幼虫肠组织的DNA、舞毒蛾核型多角体病毒(LdNPV)基因组核酸、以及棉铃虫质型多角体病毒(HaCPV)基因组核酸,未能扩增出目的片段。DsCPV基因组dsRNA扩增片段的序列与BmCPV相应基因序列具有87%的同源性,检测敏感度为1pg的DsCPV基因组dsRNA。由于松毛虫与家蚕、舞毒蛾相互之间食性不同,而且BmCPV和LdCPV对松毛虫无感染性,即在松毛虫体内不会有Bm CPV病毒和LdCPV病毒的感染,因此该结果一方面从分子水平上证实了DsCPV与BmCPV、LdCPV存在基因同源性,同时也表明了依据BmCPV的基因序列设计引物对DsCPV基因组核酸建立的RT PCR扩增体系,可以作为松毛虫种群中DsCPV的一种敏感、特异、早期、快速的检测手段。