%A 李建波, 贾会霞, 张进, 刘伯斌, 胡建军, 王丽娟, 卢孟柱 %T 毛白杨PtoWOX4a基因过表达对次生生长的影响 %0 Journal Article %D 2018 %J 林业科学 %R 10.11707/j.1001-7488.20180206 %P 52-59 %V 54 %N 2 %U {http://www.linyekexue.net/CN/abstract/article_7779.shtml} %8 2018-02-25 %X [目的]WUSCHEL-related homeobox(WOX)转录因子是植物特有的一类转录因子,参与干细胞维持、侧生器官发育和不定根再生等过程,对植物生长发育有至关重要的作用。本文通过对毛白杨PtoWOX4a基因表达模式的分析和过表达植株表型的观察,研究PtoWOX4a在杨树生长发育中的作用,为全面了解不同物种中WOX基因的作用机制奠定基础。[方法]利用qRT-PCR技术分析PtoWOX4a基因在茎顶端分生组织、幼叶、成熟叶、嫩茎、老茎、木质部、韧皮部和根中的相对表达量;利用GUS染色技术对pPtoWOX4aGUS转基因植株进行染色,通过GUS信号观察,进一步分析PtoWOX4a在不同组织中的表达模式。对过表达PtoWOX4a植株和对照植株的不定根、茎和叶片进行形态观察和生长指标测定,并通过组织切片对其解剖结构进行观察比较,分析过表达PtoWOX4a对杨树不定根、茎和叶片维管发育的影响。[结果]qRT-PCR结果显示,PtoWOX4a在茎中表达量最高,且主要集中在木质部和韧皮部,在根中表达水平次之,而在叶片等其他组织中的表达量较低;pPtoWOX4aGUS转基因植株的GUS染色结果与qRT-PCR结果一致,并发现PtoWOX4a主要在根、叶及茎的维管组织中表达。对过表达PtoWOX4a转基因植株表型观察发现,过表达PtoWOX4a抑制了不定根的伸长,3周苗龄的转基因植株不定根长度约为3~4 cm,仅为对照植株的1/3~1/2,不定根直径变粗,根部木质部区域增加。3月苗龄的过表达PtoWOX4a植株变矮,与对照植株相比,株高减少了14%~20%,节间数减少了16%~22%;对第10节间茎段的解剖结构分析发现,过表达PtoWOX4a植株茎部髓心部分变窄,比对照植株减少了10%~20%,木质部区域变宽,比对照植株增加了24%~35%,而形成层区域宽度无明显变化。此外,过表达PtoWOX4a导致植株叶片生长异常,叶片两侧边缘向上卷曲。[结论]毛白杨PtoWOX4a基因主要在杨树的维管组织中表达,过表达PtoWOX4a可影响杨树不定根、茎和叶片维管的发育。